香蕉原产热带地区，是我国南方重要的经济作物之一。广东省冬季常受强寒潮和霜冻影响，对香蕉生长发育影响很大。由香蕉束顶病毒（BBTV，单链环状DNA病毒）

引起的香蕉束顶病，对香蕉生产的危害十分严重。当前香蕉栽培品种多为三倍体，由于无性繁殖是香蕉繁育的主要方式，缺少遗传变异性，因此利用基因工程等现代科技手段提高其种质水平，具有重要意义。请根据上述材料，回答下列问题：

（1）简述香蕉大规模快速繁殖技术的过程。

（2）脱毒香蕉苗的获得，可采用 ＿的方法，此方法的依据

是 ＿和 ＿。

（3）建立可靠的BBTV检测方法可以监控脱毒香蕉苗的质量，请问可用哪些方法

检测病毒的存在？（列举两种方法）

（4）在某些深海鱼中发现的抗冻蛋白基因帅对提高农作物的抗寒能力有较好的应用价值，设想通过基因工程技术，采用重组的Ti质粒转移一段DNA进入细胞并且整合到染色体上，以促进抗冻蛋白基因在香蕉细胞中的表达，提高香蕉抗寒能力。右图是一个已插入外源DNA片段的重组Ti质粒载体结构模式图，请填出标号所示结构的名

称：① ② ③ 。

在运用转基因香蕉的过程中，在生态安全方面可能会出现什么问题？（列举两点）

（6）抑制果胶裂解酶的活性可以延长香蕉果实储藏期，请描述采用蛋白质工程技术降低该酶活性的一般过程。

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（1）选取香蕉外植体，通过诱导脱分化产生愈伤组织，然后通过调整植物激素比

例，再分化形成芽和根，获得大量试管苗（或通过诱导大量形成胚状体，制成

人工种子，适宜条件下萌发长成幼苗）（2分）。

（2）茎尖（分生组织）组织培养；茎尖不带病毒（或病毒在植物体内分布不均

匀）；植物细胞全能性。

（3）①BBTV病毒基因的检测（DNA分子杂交技术）；②BBTV病毒蛋白的检测

（获得抗血清，利用抗原一抗体的杂交反应，判断病毒是否存在）。

（4）①T-DNA ②标记基因 ③复制原点

生态安全问题包括：①外源基因扩散到其他物种（外源基因漂移）；②转基因

植株扩散影响生态系统的结构和功能；③转基因植株扩散对生物多样性的影

响；④转基因植物残体或分泌物对环境的影响。

（5）蛋白质工程方法的步骤为：①果胶裂解酶蛋白的功能分析，②果胶裂解酶蛋白

的结构预测和设计，③果胶裂解酶基因的改造。