现有甲、乙两种可能有一定毒性的化学物质,实验室研究人员欲通过动物细胞培养的方法来鉴定它们是否有毒性并比较二者毒性的强弱。请你以一个研究人员的身份参与此项研究,完成下列实验报告并回答有关问题。
I、实验原理: 。根据这种变异细胞占全部培养细胞的百分数(以下称Q值),可判断该化学物质的毒性。
II、实验材料:活的小白鼠胚胎。
III、药品用具:胰蛋白酶液、动物细胞培养液、动物细胞固定液、适宜浓度的龙胆紫溶液、滴管、培养皿、剪刀、锥形瓶、恒温箱、载玻片、盖玻片、显微镜、小白鼠正常有丝分裂各时期的高倍显微照片。
IV、实验步骤:
(1)制备细胞悬浮液:
把活的小白鼠胚胎放在培养皿中剪碎,转入锥形瓶中,加入胰蛋白酶液处理,使胚胎组织离散成单个细胞,再加入动物细胞培养液,制成细胞悬浮液。
(2)进行细胞培养:
①取A、B、C三个洁净的培养瓶, 。
②向A、B两培养瓶中分别加入等量的化学物质甲、乙,并将培养瓶摇匀。
③ 。
(3)制作临时装片:
①当细胞增殖到大约8代左右时,同时从恒温箱中取出三个培养瓶,用胰蛋白酶液处理,使培养的细胞从瓶壁上脱落,再加入动物细胞固定液以迅速杀死细胞并固定细胞分裂相。
②静置一段时间后,分别从各培养瓶底部吸取适量的细胞悬浮液,滴在与培养瓶有相同编号的载玻片的中央, ,3~5min后,盖上盖玻片。
(4)镜检和统计:
把临时装片放在显微镜下,先用低倍镜后用高倍镜,寻找处于 期的细胞,并与 对比以确认发生上述变异的细胞,同时统计该期变异的细胞占该期细胞总数的百分数(Q值)。
V、结果分析与结论:
经研究人员实验得知,A、B、C三个培养瓶的Q值依次为:QA=1.3%,QB=12.5%,QC=0.1%,由此可知该实验的结论是 。
VI、回答问题:
在实验中,C培养瓶所起的作用与小白鼠正常体细胞有丝分裂各时期高倍显微照片有何不同? 。
在线课程I、有毒物质加入细胞培养液后,培养的动物细胞会发生染色体结构或数目的变异。 IV、(2)①分别加入等量的细胞悬浮液 ③把3个培养瓶放在37℃(或适宜温度)的恒温箱中培养(3)加1~2滴龙胆紫液染色 (4)有丝分裂中期 小白鼠正常细胞有丝分裂中期高倍显微照片
V.甲、乙两种化学物质均有毒性,且乙的毒性比甲的毒性大
VI.C瓶作为A、B两瓶的对照组,起对照作用。
解析:
化学药剂、温度的剧变等,内因有生物体内代谢过程的失调、衰老等。在这些因素的作用下,染色体可能发生变异。这种变异可在显微镜下直接观察到。可以利用变异细胞的数目占观察细胞数目的比例来判断物质毒性强弱。