下图一为含有目的基因的DNA（外源DNA），图二为某质粒，表中是几种限制酶识别序列及其切割位点。用图中的外源DNA与质粒构建重组质粒。

限制酶	BamHⅠ	SmaⅠ	EcoRⅠ	Hind Ⅲ
识别序列及切割位点

请根据上述信息分析回答：

55、外源DNA、质粒分别有_______、_______个游离的磷酸基团。

56、DNA分子的一条多核苷酸链中，两个脱氧核苷酸之间以_________和_________

相连。用SmaⅠ限制酶切割外源DNA，切开的是___________和__________之

间相连的键。

57、如果用SmaⅠ酶切割外源DNA和质粒来重组质粒，其结果是_____________。

58、如果使用EcoRⅠ酶切割外源DNA和质粒，将目的基因片段与切割后的质粒混

合，加入_________酶，获得的环状DNA可能有哪几种情况？______________。

59、如果使用BamHⅠ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理外源DNA和质粒，比用EcoR

Ⅰ酶切割的优点是_____________________。

60、将重组质粒导入大肠杆菌中，培养基中需加入___________进行鉴别和筛选含有

___________的细胞。

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（12分）55. 2、0 56.磷酸 脱氧核糖 胞嘧啶脱氧核苷酸

鸟嘌呤脱氧核苷酸 57.目的基因与抗性基因被破坏 58.DNA连接

原质粒切割的粘性末端重新连接；目的基因的粘性末端连接而成环状；

目的基因与切割质粒形成 重组质粒 59.避免切割的外源DNA、质粒

的粘性末端自身环化 60.抗生素 重组质粒(目的基因）