某实验小组欲从土壤中筛选出能分泌淀粉酶的芽孢杆菌,设计实验步骤如下,请给予合理的补充。

　　　　　　　　　　

(1)采样与培养:将采集的土样混匀后称取1 g,置于经过 　　　　　法灭菌处理的液体培养基中,28 ℃振荡培养。

(2)接种与选择:为避免培养液中菌体浓度过高,需将培养液进行　　　　　处理。之后,将菌液涂布接种于以　　　　　为唯一碳源的固体培养基上,30 ℃条件下培养。为避免污染,需将培养皿呈　　　　　状态放置。此外,为排除其他因素的影响,提高实验可信度,本步骤需设计　　　　　作为空白对照。

(3)筛选与纯化:将适量的碘液滴加在平板中的菌落周围,如果菌落周围的现象是　　　　　,则说明此种菌能够　　　　　。从平板中挑取实验效果明显的目的菌株,采用　　　　　法接种于新的培养基平板,可对菌株进行进一步的纯化。

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答案:(1)高压蒸汽灭菌　(2)系列稀释(或“梯度稀释”)　淀粉

倒置　未接种的空白培养基(或接种等量无菌水的培养基)　(3)出现透明圈　分泌淀粉酶使淀粉发生水解　(平板)划线

解析:微生物培养的培养基要用高压蒸汽灭菌处理。为避免培养液中菌体浓度过高,需将培养液进行稀释。接种到以淀粉为碳源的选择培养基上,能利用淀粉的微生物才能生长,可用未接种的空白培养基作对照。微生物利用淀粉后,以微生物为中心的周围无淀粉,加入碘液不变蓝,呈现透明状。进一步纯化一般用平板划线法。