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某研究性学习小组利用荧光素-荧光素酶生物发光法,测定人参愈伤组织中ATP的含量.以研究人参细胞能量代谢的特点. 实验原理:荧光素在荧光素酶.ATP等物质参与下.进行反应发出荧光,用分光光度计可测定发光

编辑:chaxungu时间:2026-05-02 07:56:43分类:高中生物题库

某研究性学习小组利用荧光素-荧光素酶生物发光法,测定人参愈伤组织中ATP的含量,以研究人参细胞能量代谢的特点。

实验原理:荧光素在荧光素酶、ATP等物质参与下,进行反应发出荧光;用分光光度计可测定发光强度;当荧光素和荧光素酶都足量时,在一定范围内,ATP的含量与发光强度成正比。

实验步骤: 一、ATP的提取:称取一定量的人参愈伤组织,研磨后沸水浴10 min,冷却至室温,离心,取上清液。

二、ATP的测定:吸取一定量的上清液,放入分光光度计反应室内,并注入适量的所需物质,在有氧等适宜条件下进行反应,记录发光强度并计算ATP含量。

请回答:

(1)步骤一中的沸水浴处理,使酶的______________被破坏而失活。

(2)步骤二注入的物质中,属于反应物的是______________;分光光度计反应室内能量形式的转换是______________

(3)荧光素酶价格昂贵,为能准确测定出ATP的含量, 又能节省酶的用量,学习小组探究了“测定ATP时所需荧光素酶溶液的最佳浓度”,实验结果如图。

①学习小组配制了1×10-8 mol·L-1 ATP标准液、70 mg·L-1荧光素溶液(过量)和______________

溶液进行实验。

②结果表明:图中______________点所对应的荧光素酶浓度为最佳浓度。e、f、g点所对应的荧光素酶浓度不同,但发光强度相同,这是因为______________

(4)ATP测定对食品卫生监控有重要意义。食品卫生检验人员利用上述生物发光法测定某熟食品样品中细菌的ATP总含量,测算出了细菌的数量,从而判断食品污染程度。做出上述判断的理由是:每个细菌细胞中ATP的含量______________

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